【摘要】：背景 慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）是一种慢性气道炎症性疾病，目前在世界范围内的发病率和死亡率逐年增加，是当今严重的全球性公共卫生问题。根据WTO统计资料显示，COPD已成为全球第4位死亡原因，预计2020年将跃居为全球范围内死亡原因的第3位，仅次于缺血性心脏病及脑血管病，进一步加重全球的社会经济负担。随着病情的进展，COPD患者不仅存在肺功能的逐渐下降，同时还伴随着心血管系统疾病，骨质疏松，抑郁等合并症的发生，严重影响患者的生活质量。由于COPD的发病机制尚未完全阐明，因此深入地探讨COPD的发病机制，从根本上预防和治疗COPD是当今全球的研究热点。COPD患者早在发病初期就存在着血管内皮功能的受损，内皮功能障碍在COPD的发生及发展中起着重要作用。内皮祖细胞（endothelial progenitor cells，EPCs）作为内皮细胞的前体细胞，当血管内皮受损后可通过EPCs分化为成熟内皮细胞参与修复损伤的内皮，对于维持内皮功能完整和血管新生具有重要意义。近年来有研究证实姜黄素能显著增加人外周血EPCs的数量并改善其内皮修复功能，提示姜黄素对修复内皮损伤具有重要作用。然而，姜黄素对COPD患者的内皮损伤是否具有修复作用，其可能的作用机理如何，目前国内外尚未见相关研究及报道。 目的 观察不同浓度姜黄素对COPD患者外周血来源的EPCs的数量、增殖功能、一氧化氮（nitric oxide, NO）分泌功能及内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxidesynthase, eNOS）表达的影响，探讨姜黄素对COPD患者血管内皮功能保护作用的机制。 方法 选择住院的COPD病人30例，分别抽取外周血15mL，经密度梯度离心法获取各自外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells，PBMC），均分为4组，加入不同浓度姜黄素（0，5，10，15μmol/L）刺激并诱导其分化为EPCs，荧光双染色鉴定EPCs后进行细胞计数。消化收集贴壁的EPCs，再加入各浓度姜黄素，相同条件下培养一定时间（6，12，24，48h）。采用CCK-8法检测EPCs的增殖能力，硝酸还原酶法（Griess法）检测NO分泌量，Western Blot法检测eNOS蛋白的表达。 结果 与未加入姜黄素的对照组相比，姜黄素可以促进PBMC向EPCs的分化率，从而增加了EPCs的数量。随着姜黄素浓度增加，EPCs数量增加越明显，当姜黄素浓度为15μmol/L时到达高峰（P＜0.01）。姜黄素也显著改善了COPD患者EPCs的自身增殖功能及NO分泌功能，呈浓度及时间依赖关系，与15μmol/L浓度的姜黄素共培养24h后，EPCs的增殖及NO分泌功能改善最为明显（P＜0.01）。姜黄素刺激后，EPCs的eNOS表达也显著上调，且呈浓度依赖关系，当姜黄素浓度为15μmol/L时上调最为明显（P＜0.01）。 结论 姜黄素可增加COPD患者外周血EPCs的数量，改善其增殖功能及NO分泌功能并上调eNOS的表达。提示姜黄素可能通过增加EPCs数量并改善其功能活性来修复COPD患者受损的血管内皮功能。

【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R563.9